mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术

2022-08-11
浏览次数: 3414

实验原理:

酪酰胺信号放大技术(Tyramide Signal Amplification, TSA)主要是利用酪胺的过氧化物酶反应。酪胺非活性荧光素底物在HRP和过氧化氢的作用下,会被激活产生活化荧光底物,同时形成共价键结合位点,共价结合在蛋白抗原表面或附近的酪氨酸残基上,抗原和抗体的结合部位就会有大量的酪胺荧光素沉积,使抗原位点处的荧光信号增强。

酪胺荧光素底物-抗原酪氨酸共价稳定结合,故TSA信号不会受微波影响,可用热修复法清除第一轮与抗原非共价结合的抗体复合物,并能在抗体去除后保留与抗原相关的荧光信号。然后,再用第二种一抗进行第二轮孵育,同时更换另一种酪胺荧光素底物,多次循环反复,不同的酪胺荧光素进行标记就可实现多重免疫组化染色。

mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术

 

TSA原理示意图

实验方法:

实验前准备:

1PBS缓冲液、枸橼酸钠抗原修复液(或其他修复液)及3% H2O2溶液;

2、用于IHC-P的多个靶标一抗

3、mIHC试剂盒(多聚HRP二抗、TSA荧光素、TSA增强剂)


操作步骤:

石蜡切片脱蜡至水抗原热修复阻断内源性过氧化物酶血清封闭

第一个一抗孵育对应HRP二抗孵育添加TSA染色工作液1→微波加热处理

第二个一抗孵育对应HRP抗孵育添加TSA染色工作液2微波加热处理

第三个一抗孵育对应HRP二抗孵育添加TSA染色工作液3→微波加热处理

……

以此循环N细胞核复染DAPI→封片及检测

 

mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术

 

多重免疫组化原理示意图

TSA技术优势:

1. 提高信号放大倍数,显著扩增抗原相关荧光信号;

2. 可检测低蛋白丰度的靶标,提高实验体系灵敏度;

3. 可微波去除一抗/二抗及非特异性染色;

4. 降低一抗使用量,节约一抗成本;

5. 针对每张组织切片可收集到更多的数据,实现一张切片多达6种靶标的共表达;

6. 适合任何经IHC-P验证的抗体,同一样本中的靶标都可以选用高特异性的正能生物病理级抗体

mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术

7. 可在同一样本中使用同一种属来源的多种一抗进行多标记识别,例如都选用兔单克隆抗体,避免了交叉干扰,同时解决了一抗二抗种属匹配限制问题。


 

产品信息:

我司开发的多重免疫组化试剂盒,具体TSA荧光染料参考如下:TSA-480TSA-520TSA-570TSA-620TSA-670TSA-690TSA-780

试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用可以实现双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能,极大满足淋巴细胞检测、肿瘤微环境等各领域实验需求。


  • 产品货号:18002

  • 产品名称:Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Double)

  • 产品规格:50T/100T

  • 结果展示:Immunohistochemistry analysis of paraffin-embedded chimera mouse carcinoma using F4/80 (Green) and CD206 (Red) antibodies.

    mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术

  • 产品货号:18003

  • 产品名称:Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Triple)

  • 产品规格:50T/100T

  • 结果展示:Immunohistochemistry analysis of paraffin-embedded mouse hippocampus tumor using DCX (Green), GFAP (Red) and NeuN (Pink) antibodies.

    mIHC试剂盒上架 | 多重免疫组化染色TSA技术




微信扫码关注
Copyright ©2022 - 2023 成都正能生物技术有限责任公司
犀牛云提供企业云服务